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◆注意事項：
1、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP,也會發作假陽性反響。保存過久可發作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍結標本溶解后，蛋白質部分濃縮，分布不均，應充沛混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上激烈震動。
3、污濁或有沉積的標本應先離心或過濾，弄清后再檢測。
4、重復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作屢次檢測，宜少數分裝冰存。

◆ELISA需要遵從的幾個細節關鍵：
1.抗原或抗體能吸附于固相載體外表，并堅持其免疫學活性；
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構成酶結合物，而此種酶結合物仍能堅持其免疫學和酶學活性；
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在，并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺繪制規范曲線并依此計算出不知道樣品中抗體或抗原的濃度。
除了以上內容，在ELISA試劑盒細節中，稀釋前、后的樣品有必要充沛混勻，一切試劑在加樣前也須搖勻，以確保試驗的均一性。